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Technical articles賽默飛細胞計數(shù)儀介紹
細胞計數(shù)是細胞培養(yǎng)和生物研究中的一項基礎操作,廣泛應用于科研、藥物開發(fā)、免疫學、腫瘤學等多個領域。隨著實驗室自動化水平的提高,自動細胞計數(shù)儀逐漸替代了傳統(tǒng)的血球計數(shù)板與顯微鏡手動計數(shù)。賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)推出的細胞計數(shù)儀系列,為科研人員提供了一種高效、便捷且一致性強的細胞計數(shù)解決方案。
賽默飛提供多款型號的細胞計數(shù)儀,包括Countess™ II FL熒光細胞計數(shù)儀和Countess™ II自動細胞計數(shù)儀。這些設備采用成像技術和圖像分析算法,能夠自動識別細胞并進行計數(shù),同時評估細胞活力和大小等參數(shù)。
相比傳統(tǒng)方法,這些設備在減少主觀誤差、提升重復性和節(jié)省時間方面具有明顯優(yōu)勢。借助可視化界面和即插即用的操作方式,即便是沒有經(jīng)驗的操作人員也能迅速上手。
成像與分析技術
賽默飛細胞計數(shù)儀內(nèi)置攝像系統(tǒng),可采集高分辨率圖像,并結合圖像分析算法,對圖像中的細胞進行識別和分類。熒光型號的Countess™ II FL配備兩個熒光通道和一個明場通道,適用于多種染料標記細胞的檢測,如使用Trypan Blue評估細胞活力,或使用Hoechst、GFP等標記核酸和蛋白。
多種計數(shù)模式
設備支持細胞活力評估、熒光細胞計數(shù)、細胞大小分布、團聚分析等多種功能,滿足多樣化實驗需求。通過預設和自定義的分析參數(shù),用戶可以根據(jù)不同細胞類型和實驗條件調(diào)整靈敏度、大小閾值等設置。
操作簡便
大多數(shù)賽默飛細胞計數(shù)儀具備觸控屏幕,圖形化界面清晰明了。用戶只需加載樣本至專用計數(shù)載片,插入儀器,幾秒鐘內(nèi)即可獲取計數(shù)結果。設備可存儲歷史數(shù)據(jù),并支持U盤導出,方便數(shù)據(jù)管理和記錄。
樣本兼容性強
無論是貼壁細胞消化后懸液、懸浮細胞,還是經(jīng)過染色的細胞樣本,賽默飛細胞計數(shù)儀均可兼容。設備分析范圍通常在5–60 μm細胞直徑,適用于常見哺乳動物細胞,如HEK293、CHO、Jurkat、RAW264.7等。
可更換耗材與維護簡便
細胞計數(shù)儀采用一次性計數(shù)載片設計,避免樣品交叉污染,同時清潔方便。設備本身結構緊湊,日常維護簡單,只需定期清潔鏡頭和通道區(qū)域。
細胞培養(yǎng)質量監(jiān)測
細胞培養(yǎng)過程中,定期檢測細胞密度與活力至關重要。通過自動計數(shù)儀,科研人員可以快速判斷細胞是否處于對數(shù)生長期,進而決定傳代、凍存或繼續(xù)培養(yǎng)。
藥物篩選與毒理實驗
在進行藥物敏感性測試時,準確掌握細胞數(shù)量和狀態(tài)有助于數(shù)據(jù)的可靠性。Countess™ II FL等型號支持熒光標記檢測,可對凋亡、壞死等狀態(tài)細胞進行分類分析。
細胞治療與流式前處理
在免疫細胞治療和CAR-T制備過程中,細胞計數(shù)和純度評估至關重要。賽默飛細胞計數(shù)儀作為流式細胞儀前的樣本預處理工具,可以提高實驗效率和標準化水平。
科研數(shù)據(jù)標準化
自動計數(shù)結果具有更強的一致性和可重復性,適合科研論文撰寫和數(shù)據(jù)比對需求。使用圖像保存和分析報告導出功能,研究人員可以清晰記錄每次實驗的具體參數(shù)與結果。
特性 | 血球計數(shù)板 + 顯微鏡 | 賽默飛細胞計數(shù)儀 |
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操作復雜度 | 需要手動調(diào)整焦距和計數(shù),主觀性高 | 操作簡便,自動圖像識別 |
重復性 | 操作者不同可能產(chǎn)生差異 | 重復性強,誤差小 |
分析參數(shù) | 多為總數(shù)與活細胞比例 | 可測定大小、熒光、形態(tài)等多個指標 |
數(shù)據(jù)保存 | 手工記錄為主 | 可數(shù)字化存儲與導出 |
處理速度 | 慢,適合少量樣本 | 快速,適合高通量實驗 |
樣本準備
計數(shù)前應確保細胞充分分散,避免團聚。染色后應靜置1–2分鐘,使染料與死細胞充分結合。推薦使用Trypan Blue或PI等染料,根據(jù)不同實驗需求選擇合適方案。
載片使用
應使用配套的專用載片,避免反復使用導致刮痕和污染。部分型號也支持可重復使用的玻璃計數(shù)載片,但需清潔。
鏡頭與光學系統(tǒng)維護
定期清潔儀器鏡頭表面,可使用無塵布和光學清潔液。避免在高溫高濕或強光下長期存放儀器。
軟件更新與校準
設備軟件應保持更新,以獲取最新的算法和功能改進。若出現(xiàn)識別偏差,應檢查照明系統(tǒng)和圖像處理參數(shù)是否設置正確。
賽默飛細胞計數(shù)儀作為一種實驗室常用工具,為細胞分析工作提供了可靠的支持。其自動化程度和數(shù)據(jù)一致性使其適用于從日常細胞培養(yǎng)到復雜科研項目的多種需求。通過合理選擇設備型號、科學使用與維護,科研人員可以在細胞實驗中提升效率與數(shù)據(jù)質量,促進研究進展。