技術(shù)文章
Technical articlesThermo Fisher Scientific(賽默飛)Fluoroskan 微孔板熒光檢測儀(貨號:5200450)的詳細介紹,圍繞其結(jié)構(gòu)原理、核心參數(shù)、操作界面、應(yīng)用案例、功能擴展與技術(shù)支持六大部分展開,全面呈現(xiàn)其在熒光定量分析中的應(yīng)用能力。文章嚴格避開廣告性描述,著重還原其科學(xué)屬性與實際性能。
Fluoroskan 是賽默飛推出的一款微孔板熒光檢測設(shè)備,型號為 5200450,專門用于測定樣品的熒光強度。它配備穩(wěn)定的光源系統(tǒng)和高靈敏度檢測模塊,能夠適配96孔和384孔微孔板,支持熒光相關(guān)實驗如:
核酸定量(如RNA/DNA濃度檢測)
熒光標記蛋白分析
細胞活性/毒性實驗(如FDA、Calcein AM染料法)
酶聯(lián)熒光免疫分析(ELFIA)
報告基因檢測(如GFP、Luciferase)
Fluoroskan 的設(shè)計目標是為實驗室提供一種可靠、結(jié)構(gòu)緊湊的熒光定量解決方案,適用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、細胞學(xué)等研究領(lǐng)域。
Fluoroskan 采用基于濾光片的光路系統(tǒng),結(jié)合高性能的光電倍增管(PMT)進行檢測,其基本檢測流程包括:
激發(fā)光源照射樣品:選定波長范圍的激發(fā)光通過濾光片投射至樣本中。
熒光激發(fā)與發(fā)射:目標分子受激發(fā)后發(fā)出特定波長的熒光。
發(fā)射光收集:通過發(fā)射濾光片進行波長分離,排除雜散光。
光信號轉(zhuǎn)換:PMT對熒光信號進行采集并轉(zhuǎn)化為電信號,經(jīng)過處理后輸出讀數(shù)。
濾光片式系統(tǒng)相比單色器系統(tǒng)響應(yīng)速度更快,特別適用于多樣本、高重復(fù)率的檢測流程。
以下是 Fluoroskan 5200450 的關(guān)鍵性能參數(shù),便于實驗設(shè)計參考:
參數(shù)類別 | 數(shù)值或說明 |
---|---|
檢測方式 | 熒光強度(Fluorescence Intensity) |
樣本容器 | 96孔和384孔微孔板 |
激發(fā)/發(fā)射濾光片槽位 | 各6個,可自由組合 |
檢測靈敏度 | DNA檢測至<1 pg/well(依據(jù)染料與孔型) |
光源類型 | 高強度氙燈 |
動態(tài)范圍 | >6個數(shù)量級 |
讀取速度 | 96孔全板小于20秒 |
溫控模塊 | 可選,環(huán)境至45°C,適用于溫控反應(yīng) |
搖板功能 | 支持三種模式:線性、軌道、雙向(時間與速率可調(diào)) |
軟件支持 | 配套 SkanIt 軟件,支持多用戶管理與方法庫建設(shè) |
接口方式 | USB 2.0,兼容Windows平臺 |
儀器采用模塊化結(jié)構(gòu),可根據(jù)研究方向配置不同波長濾光片(如485/530 nm、355/460 nm等)以適應(yīng)不同熒光染料。
Fluoroskan 搭配 Thermo Fisher 自研的 SkanIt 軟件系統(tǒng),用于實驗編程、運行監(jiān)控和數(shù)據(jù)處理,具有以下特點:
拖拽式模塊操作,可實現(xiàn)激發(fā)-讀取-搖板-延時等動作的組合
支持預(yù)設(shè)或自定義實驗?zāi)0澹鐭晒鈽藴是€、動力學(xué)曲線等
實驗過程中可觀察各孔熒光變化,支持動態(tài)刷新
可生成熱圖、柱狀圖、熒光衰減曲線等多種可視化形式
支持輸出為Excel、CSV、PDF等格式
可自動進行平均值、標準差、背景扣除、回歸分析等基礎(chǔ)處理
支持多用戶登錄與方法加密,符合部分實驗室質(zhì)量體系要求
Fluoroskan 適配多種常見熒光實驗流程,以下列舉幾類代表性應(yīng)用:
如使用 PicoGreen 染料進行 DNA 定量時,F(xiàn)luoroskan 可在較低樣本濃度下獲得清晰信號,并通過軟件自動擬合標準曲線,輸出精確濃度數(shù)值。
在抗體或小分子標記熒光素(如FITC、Alexa Fluor)后,F(xiàn)luoroskan 可用于分析其結(jié)合強度或動力學(xué)過程,適用于ELISA替代或蛋白-配體相互作用研究。
在細胞實驗中,常用如Calcein AM染料檢測活細胞熒光,或使用ROS熒光探針檢測細胞應(yīng)激反應(yīng)。Fluoroskan 提供足夠時間分辨率進行短時動力學(xué)記錄。
配合熒光報告基因如GFP、Luciferase等,F(xiàn)luoroskan 支持時間點采樣或連續(xù)監(jiān)控,適合用于藥物篩選、高通量通量測試平臺等場景。
為了滿足不同實驗需求,F(xiàn)luoroskan 提供以下擴展功能與服務(wù):
用戶可根據(jù)實驗染料波長定制或選購激發(fā)/發(fā)射濾光片組合,如:
FITC類染料(激發(fā)485 nm / 發(fā)射 530 nm)
DAPI類染料(激發(fā) 360 nm / 發(fā)射 460 nm)
Cy5類染料(激發(fā) 620 nm / 發(fā)射 670 nm)
適用于酶反應(yīng)、細胞反應(yīng)等需恒溫條件實驗,溫控模塊支持持續(xù)加熱至45°C,且溫度穩(wěn)定性良好。
Fluoroskan 可接入Thermo Fisher自動化工作站平臺,實現(xiàn)自動進樣、數(shù)據(jù)處理、報表生成等流程整合,支持大批量樣本檢測流程。
設(shè)備配有自校準與異常診斷機制,在光源、濾光片或讀取頭狀態(tài)異常時將自動提示。定期維護建議包括:
每周檢查濾光片與光路清潔狀況
每月查看激發(fā)/發(fā)射濾光片是否老化或污染
每半年進行信號基線校準(由軟件引導(dǎo)操作)
售后支持方面,Thermo Fisher 提供標準質(zhì)保、遠程診斷、技術(shù)培訓(xùn)與應(yīng)用指導(dǎo)服務(wù),適用于實驗人員快速掌握儀器操作與故障排查技巧。
Fluoroskan(5200450)以其緊湊結(jié)構(gòu)、靈活波長組合、軟件集成度高等特點,為熒光類檢測提供了一種具備穩(wěn)定性與適應(yīng)性的實驗平臺。它適用于需要靈敏熒光信號檢測的分子生物學(xué)與細胞生物學(xué)應(yīng)用,從基礎(chǔ)科研到方法開發(fā)均可使用。實驗人員可依據(jù)自身應(yīng)用目標進行濾光片配置、程序設(shè)定及數(shù)據(jù)輸出方式的個性化調(diào)整,從而構(gòu)建符合實驗場景的檢測流程。