一、概述

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)憑借其靈敏度高、特異性好和結(jié)果可量化的特性，已成為分子生物學(xué)及臨床檢測領(lǐng)域的基本工具。隨著科研項(xiàng)目預(yù)算壓力增大和實(shí)驗(yàn)室升級(jí)需求增加，二手 qPCR 儀器的市場需求不斷增長。采購二手儀器不僅能有效控制成本，還可在短時(shí)間內(nèi)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)通量。本文將對(duì)市面上主流品牌及機(jī)型進(jìn)行梳理，并就選購、驗(yàn)收與維護(hù)要點(diǎn)提出參考意見。

二、主流品牌與代表機(jī)型

1. Roche（羅氏）

• 主要機(jī)型

• LightCycler 96／480 系列

• Cobas Z 480

• 特點(diǎn)簡述

• 兼容 96 孔和 384 孔板，可滿足中低及中高通量需求；

• 溫控均一性與靈敏度檢測經(jīng)多家實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證；

• 軟件支持多種分析方法，包括 ΔΔCt、標(biāo)準(zhǔn)曲線法、熔解曲線分析和 SNP 分型；

• 可選配梯度模塊與自動(dòng)化接口。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基因表達(dá)研究、病原體快速檢測、基因分型、表觀遺傳學(xué)等。

2. Thermo Fisher Scientific（熱電/應(yīng)用生物）

• 主要機(jī)型

• Applied Biosystems 7500／7500 Fast

• StepOne／StepOne Plus

• QuantStudio 系列（QS 3、QS 5、QS 6、QS 7、QS 12）

• 特點(diǎn)簡述

• 機(jī)型覆蓋從低通量到高通量，滿足多種實(shí)驗(yàn)規(guī)模；

• QuantStudio 系列在軟件界面中增加多組學(xué)數(shù)據(jù)管理模塊；

• 兼容多種板式，包括 96 孔、384 孔、條管和芯片格式；

• 內(nèi)置快速擴(kuò)增程序，可在短于 30 分鐘內(nèi)獲取初步定性結(jié)果。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 臨床診斷、藥物篩選、環(huán)境微生物檢測、食品安全監(jiān)控等。

3. Bio-Rad（伯樂）

• 主要機(jī)型

• CFX96 Touch／CFX384 Touch

• CFX Opus 系列

• 特點(diǎn)簡述

• 模塊化設(shè)計(jì)，故障時(shí)可拆卸更換探測或溫控模塊；

• 數(shù)據(jù)分析軟件支持多維熱圖、3D 聚類等高級(jí)可視化；

• 樣本架采用金屬底盤加密封圈設(shè)計(jì)，增強(qiáng)溫度傳輸效率；

• 通訊接口包括 USB 與以太網(wǎng)，可接入 LIMS。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基因表達(dá)定量、拷貝數(shù)變異、SNP 分型、高通量轉(zhuǎn)基因檢測等。

4. Qiagen（凱杰）

• 主要機(jī)型

• Rotor-Gene Q／Rotorgene Q MDx

• 特點(diǎn)簡述

• 旋轉(zhuǎn)式樣本架，通過連續(xù)旋轉(zhuǎn)實(shí)現(xiàn)孔間溫度均一；

• 適合小體積（≤10 µL）反應(yīng)，可節(jié)省試劑；

• 軟件界面支持熔解曲線和 HRM（高分辨率熔解）分析；

• 設(shè)備體積較小，便于在有限空間內(nèi)部署。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• DNA 甲基化分析、快速病原體檢測、微生物多樣性研究等。

5. Agilent Technologies（安捷倫）

• 主要機(jī)型

• AriaMx

• Stratagene Mx3005P

• 特點(diǎn)簡述

• 多通道激發(fā)光源與光電二極管探測器組合；

• 支持 384 孔板格式，并兼容 96 孔和條管模式；

• 軟件包含標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、定量 PCR 報(bào)告模板和批量導(dǎo)出功能；

• 通訊接口豐富，可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程訪問與數(shù)據(jù)備份。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品檢測、病毒載量監(jiān)測、基因敲降實(shí)驗(yàn)等。

6. Eppendorf（埃本）

• 主要機(jī)型

• Mastercycler ep Realplex／Realplex2

• 特點(diǎn)簡述

• 操作界面簡潔，上手較快；

• 溫控模塊與光學(xué)模塊分離設(shè)計(jì)，模塊更換方便；

• 支持中通量 96 孔板，部分型號(hào)可作梯度 PCR；

• 軟件輸出格式兼容主流文檔與圖像格式。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 基礎(chǔ)科研、小規(guī)模臨床檢測及教學(xué)實(shí)驗(yàn)室等。

7. Takara Bio（塔克拉）

• 主要機(jī)型

• TP800／TP9600

• 特點(diǎn)簡述

• 機(jī)型針對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室優(yōu)化，對(duì)接多種試劑體系；

• 支持反轉(zhuǎn)錄一體化反應(yīng)和快速 PCR 模式；

• 軟件中內(nèi)置常用引物庫和試劑配方推薦；

• 價(jià)格相對(duì)合理，性價(jià)比與整機(jī)維護(hù)成本具競爭力。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• miRNA 分析、cDNA 合成后定量、臨床快速篩查等。

8. Analytik Jena（雅納）

• 主要機(jī)型

• qTOWER 系列

• 特點(diǎn)簡述

• 提供單板、條管、芯片多種樣本支持方式；

• 用戶可在實(shí)驗(yàn)中實(shí)時(shí)切換熒光通道；

• 軟件支持批量實(shí)驗(yàn)管理、數(shù)據(jù)歸檔和報(bào)告定制；

• 設(shè)備維護(hù)簡便，耗材成本控制在合理范圍。

• 應(yīng)用領(lǐng)域

• 環(huán)境監(jiān)測、微生物定量、表觀遺傳學(xué)等。

9. 國產(chǎn)及區(qū)域品牌

• Sansure（圣湘）：SLAN-96P／SLAN-384P，主要面向臨床分子診斷市場，支持多重病原體檢測。

• Hengyi（恒逸）：Gentle 96／Gentle 384，聚焦高校及地方檢驗(yàn)所，提供維護(hù)包與質(zhì)控服務(wù)。

• GeneScript（金斯瑞）：部分型號(hào)整合核酸提取與 qPCR 功能，適合一站式實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

三、選購與驗(yàn)收要點(diǎn)

成本與預(yù)算考慮

1. 購置費(fèi)用

• 二手 qPCR 儀器價(jià)格受機(jī)型、使用年限、配件完整性及保修條款影響，通常為全新設(shè)備的 40%–70%；

• 熱門機(jī)型（如 LightCycler 480、CFX96 Touch）因需求量大，二手價(jià)格相對(duì)穩(wěn)定；

• 區(qū)域品牌及早期型號(hào)的折扣幅度更大，但需結(jié)合維護(hù)成本一并評(píng)估。

2. 運(yùn)行成本

• 試劑耗材：低漂白孔板與專用封板膜單價(jià)較高，若年運(yùn)行量大，可與耗材供應(yīng)商協(xié)商批量折扣；

• 能耗：實(shí)時(shí) qPCR 儀器功耗集中在溫控和光學(xué)系統(tǒng)，24 小時(shí)待機(jī)會(huì)增加電費(fèi)支出；

• 維護(hù)保養(yǎng)：定期校準(zhǔn)、光源更換及 Peltier 模塊檢修，建議預(yù)留年度維護(hù)預(yù)算的 5%–10%。

3. 折舊與殘值

• 實(shí)驗(yàn)室財(cái)務(wù)可根據(jù)預(yù)計(jì)使用年限（通常為 5 年）線性折舊；

• 維護(hù)完好、定期校準(zhǔn)的設(shè)備在未來轉(zhuǎn)售時(shí)，殘值可保持在購置價(jià)的 30% 左右。

4. 綜合評(píng)估

• 將購置費(fèi)、運(yùn)行成本、維護(hù)費(fèi)和潛在殘值合并計(jì)算全生命周期成本（LCC），以便在多款備選機(jī)型中做出決策；

• 對(duì)于預(yù)算緊張且通量需求中等的實(shí)驗(yàn)室，二手機(jī)型與全新中低端機(jī)型的 LCC 往往相近，可靈活權(quán)衡。

八、法規(guī)及認(rèn)證要求

1. 質(zhì)量管理體系

• 實(shí)驗(yàn)室若需通過 ISO 17025、ISO 15189 或 GLP/GMP 認(rèn)證，二手設(shè)備必須出示最近一次校準(zhǔn)報(bào)告及維護(hù)記錄；

• 建議與賣方簽訂設(shè)備性能保證協(xié)議，明確設(shè)備核心部件的質(zhì)保范圍和響應(yīng)時(shí)間。

2. 生物安全和數(shù)據(jù)安全

• 設(shè)備上運(yùn)行的 qPCR 軟件應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）接口規(guī)范，包含用戶權(quán)限管理與操作日志記錄；

• 如用于病原體檢測，須確保樣本處理區(qū)域與設(shè)備擺放區(qū)域符合生物安全柜操作規(guī)范，避免交叉污染。

3. 軟件與固件合規(guī)

• 二手儀器的軟件授權(quán)需合法轉(zhuǎn)讓，并保證后續(xù)升級(jí)與補(bǔ)丁支持；

• 符合國家及地區(qū)的數(shù)據(jù)保護(hù)法規(guī)（如 GDPR、HIPAA）要求的數(shù)據(jù)加密與備份機(jī)制。

九、未來發(fā)展趨勢

1. 微流控與數(shù)字 PCR 整合

• 越來越多的 qPCR 平臺(tái)在設(shè)計(jì)時(shí)考慮與微流控芯片或數(shù)字 PCR 模塊兼容，以提升靈敏度并降低反應(yīng)體系體積；

• 二手儀器若支持外接芯片模塊，可在常規(guī) qPCR 基礎(chǔ)上開展更精細(xì)化的數(shù)字定量研究。

2. 自動(dòng)化與機(jī)器人對(duì)接

• 實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化程度提高，液體處理機(jī)器人與 qPCR 儀對(duì)接成為常態(tài)；

• 選購二手設(shè)備時(shí)，應(yīng)預(yù)留機(jī)械臂抓取板架的空間和接口，以減少手動(dòng)操作誤差。

3. 數(shù)據(jù)分析云端化

• 趨勢向云平臺(tái)遷移，數(shù)據(jù)存儲(chǔ)與分析在網(wǎng)絡(luò)環(huán)境下完成；

• 支持云端分析的軟件授權(quán)與網(wǎng)絡(luò)安全合規(guī)將成為二手設(shè)備評(píng)估的重要指標(biāo)。

4. 熒光染料譜系擴(kuò)展

• 新一代熒光探針和染料不斷推出，能夠?qū)崿F(xiàn)更多重檢測和更低背景信號(hào)；

• 二手設(shè)備的濾光片和光源是否可升級(jí)或更換，將影響未來實(shí)驗(yàn)拓展能力。

十、結(jié)語

在選購二手實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀器時(shí)，品牌、機(jī)型和核心性能指標(biāo)只是決策的一部分。結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的通量需求、預(yù)算規(guī)劃、維護(hù)能力以及未來技術(shù)路線，才能確保設(shè)備在整個(gè)使用周期內(nèi)保持穩(wěn)定運(yùn)行，產(chǎn)出可靠數(shù)據(jù)。通過詳盡的驗(yàn)收測試和完善的售后協(xié)議，二手 qPCR 儀同樣能夠?yàn)榛虮磉_(dá)分析、病原體檢測、表觀遺傳學(xué)研究等領(lǐng)域提供支持。希望本文對(duì)實(shí)驗(yàn)室決策者在二手 qPCR 平臺(tái)選型、驗(yàn)收與維護(hù)方面提供具體參考。若有更多具體機(jī)型或采購流程方面的問題，歡迎進(jìn)一步咨詢。